• 作者： 楊振忠
• 作者服務機構： 國立清華大學分子生物研究所
• 中文摘要： 結晶毒蛋白是一種神經毒蛋白，於1965年由臺灣眼鏡蛇（Naja naja atra）蛇毒中以結晶狀
  態分離出來，且被證明為眼鏡蛇毒中的主要毒蛋白。結晶毒蛋白是由62個胺基酸組成之鹼性蛋白質
  ，而且其分子是由4個雙硫鍵相連而成的單一多胜?鏈。結晶毒蛋白完整的胺基酸排列順序及雙硫
  鍵位置都已被定出，以便於進一步研究其構造與毒性作用的關係。雙硫鍵及位於25位置的乾酪胺酸
  （Tyrosine），對於維持毒蛋白的活性構形（Active conformation），具有構造上的重要性。對
  離胺酸（Lysine）及魚精胺酸（Arginine）作逐步選擇性的化學修飾，結果顯示毒蛋白分子中有
  特定距離的Arg-33和Lys-47兩種正電荷活性基團，對於毒蛋白阻斷神經肌肉傳導的作用，具
  有功能上的重要性。
  以逐漸增加劑量的毒蛋白與Freund'5 adjuvant 一起注射到家兔體內，可以製得力價甚高的
  抗血清。抗體以商量抗原加以沈澱後，與血清分離，再將抗原-抗體複合物溶於0.53M甲酸和
  0.5M氯化鈉溶液中，以Sephadex G-100膠過濾，可百分之百分離出沈澱性抗體。純化抗體以
  Papain分解所得的Fab片段與毒蛋白結合能形成可溶性複合物，由此複合物的分子量可證明，
  每分子毒蛋白含有3個抗原決定基。由Cobrotoxin-Sepharose親和性色層分析法和免疫沈澱法比
  較的結果得知，以毒蛋白高度免疫的家免，除可製造沈澱性抗體外，還可產生非沈澱性抗體（58％
  ），但是非沈澱性抗體只能識別3個抗原決定基中的兩個。純化的沈澱性及非沈澱性抗體的中和能
  力，分別是抗血清的18及23倍。
  最近又以融合細胞瘤技術，將經過結晶毒蛋白免疫的BALB∕c 小白鼠脾臟細胞和NS-1骨髓
  癌細胞融合，得到一株穩定且能產生單原抗體的融合瘤細胞株。將此種融合瘤細胞用細胞培養或打
  入小白鼠使其產生腹水，可以大量製造單原抗體。經過親和性色層分析純化出來的單原抗體已證明
  為IgG 2a型，可和兩分子毒蛋白結合，且治療效果又比非沈澱性抗體高兩倍。因此在治療效果方
  而，由抗血清到目前的單原抗體已增加了46倍，這對毒蛇咬傷的治療，極具價值。s
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